Nouveau kit de détection d’acide nucléique du coronavirus (SARS-Cov-2)

New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit

(Flumineraiscent RT-PCR Probe Method) Product Manual

【Product name 】Kit de détection d'acide nucléique du nouveau coronavirus (SARS-Cov-2) (méthode de sonde RT-PCR fluorescente)

【Packaging specsications 】25 tests/trousse

【Intended usâge】

Ce kit est utilisé pour la détection qualitative de l'acide nucléique du nouveau coronavirus dans les écouvillons nasopharyngés, oropharyngés (gorge), les écouvillons nasaux antérieurs, les écouvillons du cornet moyen, les lavages nasaux et les aspirations nasales d'individus suspectés de COVID19 par leur professionnel de la santé. La détection des gènes ORF1ab et N du nouveau coronavirus peut être utilisée pour le diagnostic auxiliaire et la surveillance épidémiologique de l’infection par le nouveau coronavirus.

【Principles of the procailledure 】

Ce kit est conçu pour les sondes TaqMan spécifiques et les amorces spécifiques conçues pour les séquences des gènes ORF1ab et N du nouveau coronavirus (SARS-Cov-2). La solution de réaction PCR contient 3 jeux d'amorces spécifiques et de sondes fluorescentes pour la détection spécifique de cibles, et un jeu supplémentaire d'amorces spécifiques et de sondes fluorescentes est utilisé comme contrôle standard interne du kit pour détecter les gènes domestiques endogènes.

Le principe du test est que la sonde fluorescente spécifique est digérée et dégradée par l'activité exonucléase de l'enzyme Taq dans la réaction PCR, de sorte que le groupe fluorescent rapporteur et le groupe fluorescent éteint soient séparés, de sorte que le système de surveillance de la fluorescence puisse recevoir un fluorescent signal, puis grâce à l'effet d'enrichissement de l'amplification PCR, le signal de fluorescence de la sonde atteint une valeur seuil définie-valeur Ct (seuil de cycle). En l’absence d’amplicon cible, le groupe rapporteur de la sonde est proche du groupe d’extinction. À ce moment, le transfert d'énergie de résonance de fluorescence se produit et la fluorescence du groupe rapporteur est éteinte par le groupe d'extinction, de sorte que le signal fluorescent ne puisse pas être détecté par l'instrument PCR fluorescent.

Afin de surveiller l'utilisation des réactifs pendant le test, le kit est équipé de contrôles positifs et négatifs : le contrôle positif contient le plasmide recombinant du site cible et le contrôle négatif est de l'eau distillée, qui est utilisée pour surveiller la pollution de l'environnement. Il est recommandé de définir simultanément un contrôle positif et un contrôle négatif lors du test.

【Main comPonents 】

Note：( 1) Les composants de différents kits de lots ne peuvent pas être mélangés ou échangés.

(2) Préparez votre propre réactif : Kit d’extraction d’acide nucléique.

【Storage conditions et expiration date 】

For BST-SARS-25:Transporter et stocker à -20 ± 5 ℃ pendant une longue période.

For BST-SARS-DR-25:Transporter à température ambiante. Conserver à -20 ± 5 ℃ pendant une longue période.

Évitez les cycles de gel-dégel répétés. La période de validité est provisoirement fixée à 12 mois.

Voir l'étiquette pour la date de fabrication et d'utilisation.

Après la première ouverture, le réactif peut être conservé à -20 ± 5 ° C pendant 1 mois maximum ou jusqu'à la fin de la période de réactif, quelle que soit la date qui arrive en premier, pour éviter les cycles répétés de gel-dégel et le nombre de gels de réactif. -les cycles de décongélation ne doivent pas dépasser 6 fois.

【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.

【Sample requirements 】

1. Type d'échantillon applicable : solution d'acide nucléique extraite.

2. Stockage et transport des échantillons : Conserver à -20 ± 5 ℃ pendant 6 mois. Congeler et décongeler les échantillons pas plus de 6 fois.

【THNEing methotte】

1.Nucleic acid extraction

Sélectionnez un kit d’extraction d’acide nucléique approprié pour extraire l’acide nucléique viral et suivez les instructions du kit correspondant. Il est recommandé d'utiliser un kit d'extraction et de purification d'acide nucléique produit par Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd. ou un kit de purification d'acide nucléique équivalent.

2.  Rchaquetion ragent preparation

2.1 For BST-SARS-25:

(1) Retirez le mélange SARS-Cov-2 et le mélange d'enzymes, faites fondre complètement à température ambiante, mélangez soigneusement à l'aide d'un appareil Vortex, puis centrifugez brièvement.

(2) 16,5 µL de mélange enzymatique ont été ajoutés à 358,5 µL de mélange SARS-Cov-2 et soigneusement mélangés pour obtenir la solution réactionnelle mixte.

(3) Préparez un tube octal PCR propre de 0,2 mL et marquez-le avec 15 µL de la solution réactionnelle mixte ci-dessus par puits.

(4) Ajoutez 15 μL de solution d'acide nucléique purifiée, le contrôle positif et le contrôle négatif, et couvrez soigneusement le bouchon du tube octal.

(5) Mélangez bien en retournant la solution et centrifugez rapidement pour concentrer le liquide au fond du tube.

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